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      石河子大學學報(自然科學版)

      2018, (05) 609-616

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      橡膠草葉片蛋白質提取方法的選擇及雙向電泳體系的優化

      李忠晴;柴武慧;張云川;黃葉紅;李金環;魯培鑫;閆潔;

      摘要(Abstract):

      目的 為了建立起橡膠草葉片組織的蛋白雙向電泳體系。方法 采用5種不同方法提取橡膠草葉片蛋白,并通過蛋白提取率和單向SDS-PAGE電泳的比較,篩選出改良TCA-丙酮沉淀法、酚-乙酸銨沉淀法、Tris浸提法3種方法進行2-DE電泳。結果 表明選擇改良TCA-丙酮法為最合適的蛋白質提取方法。為進一步優化體系,比較了不同染色方法、上樣量和固相p H梯度預制膠條(IPG)的p H范圍對雙向電泳結果的影響,電泳結果表明使用17 cm p H 3-10的IPG膠條、上樣量為1200μg、考馬斯亮藍染色法能分離得到更多的蛋白點,是橡膠草葉片雙向電泳體系的最優條件。結論 本研究初步建立了橡膠草葉片蛋白質雙向電泳體系,為深入研究橡膠草蛋白質組學提供依據。

      關鍵詞(KeyWords): 橡膠草;蛋白質;雙向電泳

      Abstract:

      Keywords:

      基金項目(Foundation):

      作者(Author): 李忠晴;柴武慧;張云川;黃葉紅;李金環;魯培鑫;閆潔;

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      參考文獻(References):

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